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云南哪里可以做抑菌环检测试验

文章来源:http://www.casxiaodu.com 发布时间:2020-08-18

测定抗(抑)菌产品对细菌和真菌的抗(抑)菌作用。常使用的方法有抑菌环试验、最小抑制浓度测定试验、滞留抑菌效果测定试验、洗衣粉抗菌效果测定试验、振荡烧瓶试验、浸渍试验与奎因试验,可视情况选用。云南哪里能做抑菌环检测?中科检测遵守《卫生部消毒产品检验规定》进行检测,项目齐全,具备CMA和CNAS资质,出具的检测报告卫计委认可,在全国范围内有效!


原理

利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不同浓度梯度,以显示其抑菌作用。试验通过抑菌环大小以判断其是否具有抑菌能力。本试验适用于抑菌剂与溶出性抗(抑)菌产品的鉴定。

 

试验器材

(1)金黄色葡萄球菌 (ATCC 6538)、大肠杆菌(8099)、白色念珠菌 (ATCC 10231) 菌悬液(见2.1.1.2)及根据抑菌剂特定用途所用的其他菌悬液。

(2)抑菌剂载体 (5 mm 直径园形新华一号定性滤纸片,经压力蒸汽灭菌处理后,置 120℃烤干 2h,保存备用)。

(3)活菌培养计数所需器材(见 2.1.1.3)。

(4)微量移液器(5μl~50μl,可调式)。

(5)游标卡尺。

(6)营养琼脂培养基、胰蛋白胨大豆琼脂培养基与沙堡琼脂培养基

 

操作程序

(1)抑菌片的制备:对液体抑菌剂,取无菌并干燥的滤纸片。每片滴加实际使用浓度抑菌剂溶液 20μl,然后将滤纸片平放于清洁的无菌平皿内,开盖置温箱(37℃) 中烤干,或置室温下

自然干燥后备用。溶出性抗(抑)菌产品,可直接制成直径为 5mm,厚不超过 4mm 圆片(块),每 4 片(块) 一组。

(2)阴性对照样片的制备:取无菌干燥滤纸片,每片滴加无菌蒸馏水 20μl,干燥后备用。溶出性抗(抑)菌产品的阴性对照样本,应取同种材质不含抑菌成份的样品,制成与试验组大小相同的样片(块)。

(3)试验菌的接种:用无菌棉拭子蘸取浓度为 5×105cfu/ml~5×106cfu/ml 试验菌悬液,在营

养琼脂培养基平板表面均匀涂抹 3 次。每涂抹 1 次,平板应转动 60°,最后将棉拭子绕平板边缘涂抹一周。盖好平皿,置室温干燥 5min。

(4)抑菌剂样片贴放:每次试验贴放 1 个染菌平板,每个平板贴放 4 片试验样片,1 片阴性

对照样片,共 5 片。用无菌镊子取样片贴放于平板表面。各样片中心之间相距 25mm 以上,与平板的周缘相距 15mm 以上。贴放好后,用无菌镊子轻压样片,使其紧贴于平板表面。盖好平皿,置 37℃温箱,培养 16h~18h 观察结果。用游标卡尺测量抑菌环的直径 (包括贴片) 并记录。试验重复 3 次。

测量抑菌环时,应选均匀而完全无菌生长的抑菌环进行。测量其直径应以抑菌环外沿为界。

评价规定

(1)抑菌作用的判断:

 抑菌环直径大于 7mm 者,判为有抑菌作用。

 抑菌环直径小于或等于 7mm 者,判为无抑菌作用。

(2) 3 次重复试验均有抑菌作用结果者,判为合格。

(3)阴性对照组应无抑菌环产生。否则试验无效。

注意事项

(1)每次试验均应设置阴性对照,不可省略。在报告中亦必须将对照组的结果列出。

(2)接种用细菌悬液的浓度应符合要求。浓度过低,接种菌量少,抑菌环常因之增大; 浓

度过高,接种量过多,抑菌环则可减小。

(3)应保持琼脂浓度的准确性,否则可影响抑菌环的大小。

(4)培养时间不得超过 18h。培养过久,部分细菌可恢复生长,抑菌环变小。

(5)抑菌环直径可受抑菌剂的量、抑菌性能和干湿度影响。故抑菌剂滤纸片应在试验当天制备。


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