流感病毒H1N1杀灭试验方法步骤


病毒杀灭试验主要适用于消毒产品及抗菌材料产品审定或日常监测,采用具有一定代表性的、活的病毒及其细胞感染技术,评价各种用途的消毒杀菌因子对测试病毒的杀灭效果。
流感病毒分为甲、乙、丙、丁4型,人流感主要是甲型流感病毒和乙型流感病毒引起。流感病毒杀灭试验是针对流感病毒采取的一种检测方式,用来证明消毒产品能够杀灭流感病毒的效果。流感病毒H1N1杀灭试验采用的样本是A型H1N1流感病毒,一般采用静滴法、气溶胶法等测试方法。
流感病毒H1N1杀灭试验产品范围
消毒剂类:包括乙醇(酒精)、戊二醛、环氧乙烷、过氧乙酸、过氧化氢、二氧化氯、酚类消毒剂等
消毒器械类:包括紫外消毒机、等离子消毒机、臭氧消毒机、过滤式净化器、过氧化氢消毒器等
抗菌材料类:包括纺织品皮革、陶瓷卫浴、高分子材料、抗菌玻璃、涂料漆膜、滤网、纳米材料等
流感病毒H1N1杀灭试验方法步骤
流感病毒H1N1病毒杀灭试验是一种检测病毒活性的试验,用于衡量病毒灭活处理的有效性,病毒灭活试验的步骤如下:
1.培养病毒:将需要检测的病毒在合适的细胞培养基中进行培养,以获取足够数量的病毒。
2.病毒灭活:将5ml甲型H1N1流感病毒悬液加入气溶胶发生器,开启电源,连续雾化30min(雾化气溶胶颗粒大小约3.5pm),分别开启病毒杀灭工具。
3.病毒活性检测:打开液体撞击采样器,收集雾化的流感病毒气溶胶颗粒,导入装有5mlMEM的无菌试管中。将上、下抽气口所得病毒悬液,以空斑形成法检测病毒滴度;上述试验重复3次,计算病毒滴度的平均值。
4.流感病毒滴度测定:将收集到的流感病毒液10倍梯度稀释后,常规接种MDCK细胞,吸附1~2h后,加入营养物(含琼脂的2×MEM),置34℃、5%CO2。条件下培养3d,以福尔马林缓冲结晶紫溶液(0.1%)固定和染色,计算空斑形成单位(PFU/ml)。
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